外泌体的多样本自动分离与纯化，现在它真的来了！！！

外泌体（exosomes）是一种由细胞分泌的、粒径分布在30-200 nm之间的细胞外囊泡，其表面与内部携带大量蛋白质、脂质、核酸等生物分子。作为细胞间物质与信号通讯的重要媒介，外泌体在免疫应答、病毒感染、肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病等生命活动中起着重要的作用。由于外泌体携带的生物分子可直接反映来源细胞的生理与病理状态，对这些生物分子的测定可使研究者更深入地了解体内的生理或病理情况，并有望作为肿瘤或其他疾病的诊断标志物。

虽然外泌体的检测存在上述优势，但目前的外泌体提取方法仍为实验人员手工操作，由于外泌体提取的效果直接与实验人员的操作技术相关，导致提取的重复性与稳定性存在一定欠缺。且现有方法大多存在步骤繁琐耗时长、人员上手难度大等劣势。如何准确高效地提取外泌体，使外泌体的制备流程标准化、稳定化，一直是研究者们关注的热点。

现在，外泌体的多样本自动分离与纯化，它终于来了！由上海迈景纳米科技有限公司自主研发的MagExo®外泌体提取试剂盒，通过优化的试剂体系与磁珠载体，可同基于磁珠的核酸自动化提取一样，实现稳定、标准化外泌体的多样本自动分离与纯化。从已有的核酸自动化提取可见，自动化的样本处理不仅能降低实验人员的劳动强度，还可减少提取过程中的人为实验误差、提高处理效率与通量，高通量的仪器大幅节省了时间成本与人力成本，增加了实验的重复性与数据的可靠性。现在，在外泌体的提取上这些也都可以实现，以下是MagExo^®外泌体提取试剂盒的简要提取流程：

图2 MagExo^®外泌体提取试剂盒的提取流程示意图

外泌体在反应液中通过磁珠的表面基团以及磁珠与其他杂质的相对作用力被捕获后，再通过洗脱液从磁珠表面被释放，该流程与磁珠提取核酸的流程基本一致，可方便地嫁接到市售核酸提取仪中，通过简单的程序修改，实现外泌体的自动化提取。

图3 磁珠法核酸提取示意图

以下是基于市面常见的32通量半自动核酸提取仪设计的外泌体自动化提取方案，仅供参考，具体可根据实验自行设计。（全自动核酸提取仪更佳，仪器包括移液部分，只需放入试剂样本即可）

图4 深孔板板位内试剂与样本示意图

依上图，在96孔深孔板中依次加入试剂和样本。上机前，设置好程序，包括孵育与洗脱。第一遍洗脱完毕后，使用排枪将2/8列Elution Buffer移至3/9列，设置新的程序进行二次纯化（单块深孔板最多可做三次纯化）。目前市售的核酸提取仪温控都是加热处理系统，我们在这里可考虑冰袋或冰块对提取过程做温控处理，使整个提取在低温条件下进行。

如果您正苦于样本种类多、样本量极大，无法快速高效地获取外泌体，快来联系我们吧。也许 MagExo®就是您一直找寻的解决方案。

 参考文献：

[1] S. Wang, A. Khan, R. Huang, et al., Biosens. Bioelectron. 2020, 154, 112056.

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